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啤酒酵母的擴(kuò)大培養(yǎng)
閱讀:485 發(fā)布時(shí)間:2022-11-17啤酒酵母的擴(kuò)大培養(yǎng)
啤酒酵母的擴(kuò)大培養(yǎng)分為實(shí)驗(yàn)室階段和生產(chǎn)階段。
實(shí)驗(yàn)室階段為純培養(yǎng)的酵母菌種擴(kuò)大培養(yǎng)至漢生罐,基本流程如下:試管斜面富氏瓶巴氏瓶卡氏罐漢生罐增殖罐發(fā)酵罐在實(shí)驗(yàn)室階段,純培養(yǎng)的酵母菌接種于富氏瓶或試管,24~25℃培養(yǎng)24h,起泡時(shí)轉(zhuǎn)接入新的富氏瓶或試管。重復(fù)以上操作兩三次,可以使酵母充分強(qiáng)壯。25℃培養(yǎng)2~3d后,將酵母液移入加有500mL麥芽汁的巴氏瓶,20℃培養(yǎng)2~3d。在發(fā)酵旺盛的時(shí)候移入卡氏罐,加麥芽汁5L18C培養(yǎng)3~5d,再移入漢生罐。
實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)工作般每年僅進(jìn)行兩次,采用漢生罐保留菌種,于2~4℃保存,每月?lián)Q新麥芽汁擴(kuò)大培養(yǎng)次。實(shí)驗(yàn)室階段易達(dá)到無菌環(huán)境,擴(kuò)大倍數(shù)10倍左右。培養(yǎng)溫度逐步降低,以利于后期的發(fā)酵。在巴氏瓶和巴氏瓶前的培養(yǎng)基為8%~10%麥芽汁;卡氏罐后,培養(yǎng)基為10%~12%加酒花麥芽汁。
以后為生產(chǎn)階段,取卡氏罐內(nèi)增殖的酵母種子液接入裝有180L麥芽汁的漢生罐內(nèi),麥芽汁的溫度為10℃。為保證酵母繁殖需要的氧氣,通風(fēng)3~5min,10~13℃培養(yǎng),約48h后酵母進(jìn)入發(fā)酵旺盛期。將發(fā)酵旺盛的酵母培養(yǎng)液移至增殖罐。為保留酵母種子,20L母液保留在漢生罐內(nèi),加入10℃無菌麥芽汁180L。管道和增殖罐嚴(yán)格殺菌后,取180L酵母培養(yǎng)液移入增殖罐內(nèi),再加10~12℃的麥芽汁400~450L。
待酵母進(jìn)入發(fā)酵旺盛期后,再加入10~12℃麥芽汁至2000~2300L。24h后,將培養(yǎng)液移入添加罐。移入后加10~12℃的麥芽汁2500L。24h后,再加入7~8C的麥芽汁4500L。24h后,再加麥芽汁9000~20000L(有些廠分兩槽,每槽9000L)。發(fā)酵溫度8.5~9.5℃,終控制溫度4~4.2℃,糖度為4~4.2。經(jīng)過上述工藝,終得到約100L泥狀酵母,這些酵母即為生產(chǎn)用的“零"代酵母。
發(fā)酵速率與細(xì)胞數(shù)成正比,應(yīng)盡可能得到數(shù)量較多的茁壯酵母。
在培養(yǎng)過程中,酵母細(xì)胞數(shù)大能達(dá)到(54~100)×105個(gè)-mL-1,培養(yǎng)槽的細(xì)胞數(shù)可達(dá)(50~65)×105個(gè)mL-1。為得到較多酵母,應(yīng)注意以下幾點(diǎn):麥芽汁組成適宜;有適宜的溶解氧;嚴(yán)格執(zhí)行溫度控制程序。稀釋倍數(shù)般不超過5倍,稀釋后的細(xì)胞數(shù)在8×105個(gè)-mL-1左右。酵母出芽率的高低是酵母菌種茁壯與否的標(biāo)志。在添加麥芽汁后,若營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和溶解氧適宜,出芽率急劇增加。般在漢生罐移出時(shí),出芽率為35%~40%,開放式的繁殖槽倒出時(shí)為20%~30%,糖度為7.5~8.0,因此般培養(yǎng)24h后添加麥芽汁或倒灌。新培養(yǎng)的酵母死亡率低,般要求在1%以下為佳。在擴(kuò)大培養(yǎng)過程中,每次接種完畢后,剩余菌液必須進(jìn)行鏡檢,同時(shí)接入培養(yǎng)基做保存試驗(yàn),以檢驗(yàn)有無雜菌感染。