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生產的種子制備

閱讀:185          發布時間:2022-11-16

生產的種子制備

內的生產菌種按其在深層培養中菌絲的形態分為絲狀菌和球狀菌兩類。絲狀菌根據孢子顏色又分為黃孢子絲狀菌和綠孢子絲狀菌,目前生產上用的菌種是產黃青霉菌(penicilium chrysogenum)的變種-綠色絲狀菌。

球狀菌根據其孢子顏色不同,分為綠孢子球狀菌和白孢子球狀菌,目前生產上多用白孢子球狀菌。不同菌種對原材料、培養條件有定差別,生產能力存在較大差異。

球狀菌的生產工藝流程如下所示:

沙士管保藏菌種母瓶斜面大米孢子種子罐繁殖罐

發酵罐絲狀菌的生產工藝流程如下所示:

冷凍管親米生產米種子罐發酵罐將沙土管的孢子接入拉氏培養基的母瓶斜面,25℃培養6~7d,長成綠色孢子。孢子懸浮液接入裝有大米的茄子瓶內,25℃,相對濕度40%~45%,培養6~7d,制成大米孢子,真空干燥,保存備用。

生產時按定量接入種子罐內,25℃,通氣量為1:2.0m3-(m3-min)-1,培養40~45h,菌絲濃度達40%(體積分數)以上,菌絲形態正常。1%~5%的接種量接入繁殖罐內,經過25℃,通氣量為1:1.5m3(m3-min)-1,培養13~15h,菌絲體積40%以上,殘糖在0.1%左右,無菌檢查合格便可作為發酵罐的種子。

冷凍管孢子接入在混有0.5%~1.0%玉米漿的大米上培養得到原始親米孢子,然后再移入培養瓶培養成熟得到大米孢子(又稱生產米),親米和生產米均為25℃靜置培養。經常觀察生長情況,在培養3~4h后,大米表面長出明顯小集落時振蕩搖勻,使菌絲在大米表面能均勻生長,待10d左右形成綠色孢子即可收獲。親米成熟后接入生產米后經過激烈振蕩后放置恒溫培養,生產米的孢子量要求每粒米300萬孢子以上,親米、生產米孢子保存在5℃冰箱內。

工藝要求將新鮮的生產米(指收獲后的孢子在10d以內使用),接入含有花生餅粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、飴糖的種子罐內,28℃,通氣量為1:1.5m3-(m3-min)-1,培養5~6h,ph由6.0~6.5下降到5.0~5.5,菌絲呈菊花團狀,平均直徑在100~130um,菌球濃度為(6~8)×104個-mL-1,沉降率在85%以上,計算接入的體積,移入發酵罐。球狀菌以新鮮孢子為佳,其生產水平優于真空干燥的孢子,能使發酵單位的批次差異減少。


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